冯延叶 赖煦卉^* 李艳玲

上海英基生物科技有限公司

摘要(Abstract)：

本文报道了Stepwise Pro(SWP) DNA文库构建技术。该技术整合分步连接、耐盐耐热T4连接酶及修饰接头，解决了传统方法效率低、接头二聚体及模板利用率不足等瓶颈。其连接效率达80%~95%，显著优于二代TA连接技术。处理微量DNA时，展现出高模板利用率、低重复率与高文库复杂度。在液体活检中，能高灵敏度检出低至0.1% VAF的突变（灵敏度91%），为癌症早筛和ctDNA分析提供了高效可靠的解决方案。

关键词(KeyWords)：

DNA文库构建；耐盐耐热T4 DNA ligase；接头修饰；高通量测序

参考文献(References)：

［1］ Smith J， et al. Challenges in ctDNA analysis for early cancer detection［J］. Cancer Cell， 2020. 

［2］DiCicco A， et al. T4 DNA ligase variants with increased resistance to salt: US17675278 ［P］. 2022. 

［3］ Zhu Z， et al. T4 DNA ligase variants with increased thermostability: US17677655 ［P］. 2022. 

［4］ Zhu Z， et al. T4 DNA ligase variants with increased ligation efficiency: US17699354 ［P］. 2022.